MACS Technology 实现高活力、零碎片的样品制备,助力单细胞组学研究
5269 人阅读发布时间:2019-07-08 14:29
美天旎 MACS Technology 组织解离及磁性分选技术,带来了将实体组织温和快速地解离为单细胞的优化解决方案,并可高效富集稀有细胞种类,满足当前单细胞水平组学分析技术对初始样本地严苛要求,为肿瘤异质性研究、免疫调节机理及组织器官发育等研究领域获得革命性突破提供了先决条件。
卓越单细胞样品制备推荐工作流程:
1. 初始样品保存
对于人原发肿瘤等珍贵组织,在得到良好的实验条件处置前,应充分保持组织内较高的细胞活力及细胞结构、功能甚至转录组保持完好。
MACS 组织保存溶液(MACS Tissue Storage Solution,130-100-008)可保证组织于 2~8 ℃ 避光条件下维持新鲜长达 48 小时。
- 有效避免细胞凋亡和坏死
- 维持细胞正常功能:如干细胞可保持其分化潜能,免疫细胞不出现异常通路激活
2. 组织解离
多种经优化的组织解离试剂盒搭配 gentleMACS 自动组织解离器,实现温和、快速且标准化的组织解离,所得单细胞悬液保持极高的活细胞比例和细胞活力。
全部解离试剂盒均经过优化和数据验证,有效保存细胞活力并提供表位保护信息。解离试剂盒名称及应用列表如下:
GentleMACS 自动组织解离器:
- 快速优化且高通量——可以同时独立处理 8 个组织样本;
- 样本之间独立操作——可同时独立运行多达 8 个解离程序;
- 个性化的程序设定——除内置的 30 多个样本处理程序外,可根据自己的经验进行自编程,使结果更加完美。
3. 滤除组织块
SmartStrainer 细胞滤网可有效滤除未充分解离的组织或细胞团,其独特的设计在于:
- 独特的排期通道设计,避免排液不畅甚至液体溢出;
- 可兼容 15 mL 和 50 mL 离心管;
- 孔径有 30 μm,70 μm 和 100 μm 三种规格,并可叠加使用。
4. 红细胞裂解
经优化的红细胞裂解液,经过验证不对白细胞在内的其他细胞类型造成影响,且使用方便。
5. 去除死细胞
死细胞去除试剂盒(Dead Cell Removal Kit, 130-090-101)基于磁珠分选原理,通过识别凋亡和死亡细胞膜特异性标记物,精确获取并去除,从而达到提升样品活细胞比例的目的,保证单细胞测序结果的真实性和可重复性。
还推荐用于其他应用:
- 流式细胞分选前的死细胞去除;
- 培养前的死细胞去除
- 冻存的细胞复苏后去除死细胞;
- 去除精子样品中的死细胞;
- 细胞转染前后的死细胞去除
6. 目的细胞富集
单细胞测序技术在捕捉罕见细胞群体或稀有转录本具有极大的技术优势,但这需基于一定的目的细胞类群数量。比如进行肿瘤微环境研究中,对肿瘤浸润细胞(TIL)的分析。由于实体肿瘤中 TIL 含量极低,推荐进行有效的富集后再进行标记建库操作。
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