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不容错过的外泌体研究方法

人阅读 发布时间:2017-01-04 15:57

外泌体是由多种类型的细胞(如 T 细胞、B 细胞、树突状细胞、血小板、神经元细胞和上皮细胞)分泌的一种囊泡状结构。它参与多种生物学过程,包括免疫监控、血液凝固、神经传递、干细胞维护和组织修复等。

调查发现,在分离外泌体时,约有 56% 的人采用超速离心法,但该方法有其局限性:
  • 耗时耗力:需 8~30 个小时
  • 处理样本少:每次最多处理 6 个样品
  • 需要大量的起始材料
  • 产量不高
另外,由于外泌体体积小,检测也是一大难题。总之,外泌体的纯化和检测都给这一领域的研究带来了不小的技术局限性。

为解决上述难题,美天旎研发了 Exosome Isolation Kit,与传统分离外泌体的方法(超速离心)相比,磁珠分选有着明显的技术优势:
  • 操作简单,省时省力(无需超速离心)
  • 样本最小体积可低至 0.5 mL
  • 可同时快速筛选并检测外泌体表面蛋白
目前有 39 种连接不同类型抗体的外泌体捕获微球,利用流式细胞术可以检测 37 种不同类型的外泌体和 2 种同型对照。像人血浆、细胞培养上清中或者尿液、腹水中的外泌体,我们建议使用 Exosome Isolation Kit CD9, human, Exosome Isolation Kit CD63, human,或者 Exosome Isolation Kit CD81,先进行预富集,然后再进行后续的检测。

简单五步,完成外泌体的纯化和分析(以血浆为例):
  1. 将全血进行离心处理,收集血浆;
  2. 用 Exosome Isolation MicroBeads CD9, human, Exosome Isolation MicroBeads CD63, human, 或 Exosome Isolation MicroBeads CD81, human 与血浆共孵育 1 小时;
  3. 将磁性包被的产物加到放置于 μMACS 分离器的 μMACS 分选柱中;
  4. 未结合磁珠的血浆成分顺利流出分选柱;
  5. 将 μMACS 分选柱移出磁场,洗脱即可得到纯化的外泌体。
相关产品推荐:
 
货号 产品 规格
130-110-913 Exosome Isolation Kit CD9, human for 20 isolations
130-110-918 Exosome Isolation Kit CD63, human for 20 isolations
130-110-914 Exosome Isolation Kit CD81, human for 20 isolations
130-110-912 Exosome Isolation Kit Pan, human for 20 isolations
注:内含磁珠试剂、分选柱及分选 buffer

Exosome 流式检测原理示意图:

 

产品推荐:外泌体流式分析产品:MACSPlex Exosome Kit, human(# 130-108-813)。

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